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技術服務
穩定細胞株構建
服務背景
穩定細胞株構建是指將外源DNA克隆到具有某種抗性的載體上,載體被轉染到宿主細胞并整合到宿主染色體中,用載體中所含的抗性標志進行篩選。最常用的真核表達載體的抗性篩選標志物有新霉素(neomycin)、潮霉素(hygromycin)和嘌呤霉素(puromycin),常用G418來代替新霉素進行選擇性篩選,篩選得到可穩定表達目的蛋白,或者穩定表達沉默特定基因的細胞株。
穩定細胞株的構建周期長、難度大,每一步都很關鍵,尤其是細胞轉染,常用物理方法(電轉)、化學方法(脂質體等)、生物方法(病毒),根據不同的實驗條件,選擇最好的方法,來達到實驗目的。
服務原理
穩定細胞株構建的基本原理是用基因導入工具或基因編輯工具,改造原始細胞基因組,使改造后的細胞具有某些特定表型,并經過抗性篩選或其他篩選方法,使其表型能長期傳代穩轉。
服務優勢
·科佰擁有龐大的母細胞庫和數據庫資源,熟悉細胞特性。
·多樣而靈活的基因導入和編輯工具。
·豐富的構建經驗和成功案例。
· 快速高效的開發流程。
·嚴格的檢測和質控。
·銜接穩轉細胞株應用方法開發與優化。
·提供全流程和完整系統的開發。
平臺介紹
科佰生物在穩定細胞株構建上擁有豐富的經驗,熟悉每一步操作,尤其對關鍵步驟有獨到的經驗,成功為眾多科研客戶構建目的細胞株(過表達、可誘導過表達、沉默、可誘導沉默、報告基因等等)。
服務流程
質粒類方法工作流程
病毒類方法工作流程
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